Pour reconstituer un peptide lyophilisé, ajoutez le solvant adapté (eau bactériostatique, PBS, ou acide acétique 10 mM selon le peptide) puis calculez la concentration avec C (mg/mL) = masse (mg) / volume de solvant (mL). Agitez par rotation douce, jamais au vortex, puis aliquotez et congelez immédiatement.
Choisir le bon solvant selon la nature du peptide
Le choix du solvant dépend des propriétés du peptide. Pour la grande majorité des peptides de recherche, comme le BPC-157, le TB-500, l'Ipamoréline ou le GHK-Cu, l'eau bactériostatique stérile ou le PBS suffisent largement.
Pour les peptides avec un résidu hydrophobe en bout de chaîne, comme l'Hexaréline, un solvant légèrement acide peut être nécessaire avant dilution. Pour les peptides plus gros comme l'IGF-1 ou le sémaglutide, l'acide acétique dilué est recommandé en premier solvant pour éviter l'agrégation. Les laboratoires des universités de Paris, Lyon, Bordeaux et Bruxelles qui commandent chez Euro Peptide X reçoivent un guide de reconstitution avec chaque COA.
| Peptide / famille | Solvant primaire | Dilution finale | Concentration stock recommandée |
|---|---|---|---|
| BPC-157, TB-500, GHK-Cu | Eau bactériostatique stérile | PBS pH 7,4 | 1–2 mg/mL |
| GHRP-2, GHRP-6, Ipamoreline, Hexarelin | Eau stérile | PBS pH 7,4 | 1–5 mg/mL |
| Sémaglutide, IGF-1 LR3, IGF-1 DES | Acide acétique 10 mM | PBS + 0,1 % BSA | 0,5–1 mg/mL |
| CJC-1295, GHRP, sécrétagogues | Eau stérile | PBS pH 7,4 | 1–2 mg/mL |
| Acétyl Hexapeptide-8 (Argireline) | Acide acétique 10 mM | PBS ou eau distillée | 1 mg/mL |
Calcul de la concentration stock : la formule étape par étape
La formule de base est simple : concentration (mg/mL) égale la masse du peptide en mg, divisée par le volume de solvant ajouté en mL. Par exemple, un flacon de 5 mg de BPC-157 avec 5 mL d'eau bactériostatique donne une concentration de 1 mg/mL. Pour viser une concentration précise, on calcule plutôt le volume à ajouter : volume égale la masse divisée par la concentration souhaitée. Pour 2 mg/mL avec 5 mg de peptide, cela donne 2,5 mL de solvant. Notre calculateur en ligne fait ces conversions automatiquement, du mg au µg, au nmol et au µM.
Erreurs fréquentes de reconstitution et comment les éviter
Trois erreurs reviennent souvent lors de la reconstitution. La première est de secouer fort au vortex : cela crée des forces mécaniques qui peuvent abîmer les peptides de grande taille comme le sémaglutide ou le tirzépatide. Préférez toujours une rotation douce.
La deuxième erreur est de reconstituer directement à la concentration de travail finale. Mieux vaut d'abord préparer un stock concentré, puis diluer selon le besoin. La troisième est de ne pas aliquoter tout de suite : une solution entière subit alors un cycle de gel et dégel à chaque utilisation. Préparez plutôt plusieurs petites portions juste après la reconstitution.
Aliquotage et conservation de la solution stock
Une fois la solution stock prête et homogène, il faut l'aliquoter sans attendre. Répartissez-la dans plusieurs petits tubes, étiquetez chacun avec le nom du peptide, la concentration, la date et le numéro de lot.
Congelez tout de suite à −80 °C pour une conservation optimale, en général au moins 3 mois. À +4 °C, la plupart des solutions stock se conservent 7 à 14 jours maximum. Tenez un registre de vos solutions, une bonne pratique attendue lors des audits qualité.
L'essentiel à retenir sur la reconstitution
Pour une solution stock fiable et reproductible :
- Formule clé : C (mg/mL) = masse du peptide (mg) ÷ volume de solvant ajouté (mL)
- Solvant : eau bactériostatique ou PBS pour la plupart des peptides ; acide acétique 10 mM pour Sémaglutide, IGF-1, Hexarelin
- Agitez par rotation douce uniquement, jamais au vortex, qui peut dénaturer les peptides de haute masse molaire
- Aliquotez immédiatement (50–200 µL) et congelez à −80 °C pour limiter les cycles gel/dégel
- Solution stock à +4 °C : 7–14 jours maximum (3–7 jours pour les peptides fragiles comme IGF-1 ou GLP-1)
Pour aller plus loin
- PubMed : protocoles de reconstitution des peptides— Publications sur les protocoles de reconstitution des peptides
- ICH Q2(R2) : validation des procédures analytiques— Référentiel ICH pour la validation des solutions analytiques
- IUPAC : nomenclature des peptides et protéines— Référentiel IUPAC sur la nomenclature peptidique
