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SPPS (synthèse peptidique en phase solide) : définition
La SPPS est la méthode standard de fabrication des peptides : la chaîne est construite acide aminé par acide aminé sur un support solide (une résine), puis détachée et purifiée.
Le principe
Mise au point par Bruce Merrifield (prix Nobel de chimie 1984), la SPPS fixe le premier acide aminé sur une résine. On ajoute ensuite les suivants un par un, en répétant un cycle de déprotection et de couplage. Le support solide permet d'éliminer les réactifs en excès par simple lavage.
À la fin, le peptide est détaché de la résine, généralement avec de l'acide trifluoroacétique (TFA), puis purifié par HPLC préparative.
Pourquoi c'est important pour la qualité
Chaque cycle a un rendement légèrement inférieur à 100 %. Sur un peptide de 40 acides aminés, les petites pertes s'accumulent et produisent des impuretés proches du produit : séquences tronquées, acides aminés manquants. C'est pourquoi la purification et le contrôle par HPLC et LC-MS sont indispensables.
Voir aussi
Réactifs et guides liés
Sources
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